對于紫外可見分光光度計,你了解多少?
紫外可見分光光度計的用途之一是物質(zhì)的鑒定,主要是用來測量待測的未知或者已知的物質(zhì)對可見光的吸光度,并且同時的進行定量分析。用途之二是進行待測物質(zhì)和標(biāo)準物及標(biāo)準圖譜對照的分析。用途之三是用來比較某種物質(zhì)比較大的吸收波長吸收系數(shù)一致性。用途之四是進行物質(zhì)的純度檢驗。紫外可見分光光度計的用途之五是用來推測化合物的分子結(jié)構(gòu)以及其構(gòu)成等。用途之六是判定絡(luò)合物的組成測定。
A.紫外可見分光光度計的原理:
紫外可見分光光度計的工作原理:基于朗伯-比耳(Lambert-Beer)定律,即物質(zhì)在一定濃度下的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度呈正比。
通常表述為:當(dāng)一束平行的單色光通過某一均勻的有色溶液時,溶液的吸光度與溶液的濃度和光程的乘積成正比,其數(shù)學(xué)表達式如下:
A=-lg( It/I0 )= - lgT= =εbC
式中,A 為吸光度;I0為入射的單色光強度;It為透射的單色光強度;T為物質(zhì)的透射率;ε為摩爾吸光系數(shù)(L·mol-1·cm-1);b為被吸收層厚度(cm),即比色皿的光程;C為物質(zhì)的摩爾濃度(mol·L-1);
B.紫外可見分光光度計常見應(yīng)用:
紫外可見分光光度計廣泛應(yīng)用于制藥、醫(yī)療衛(wèi)生、化工、能源、機械、冶金、環(huán)保、地質(zhì)、食品、生物、材料、農(nóng)業(yè)、林業(yè)、漁業(yè)等行業(yè),在高等教育、計量科學(xué)和科研院所中的教學(xué)、科研領(lǐng)域,以及生產(chǎn)中的質(zhì)量控制,原材料和產(chǎn)品檢驗等各方面發(fā)揮著重要作用,是理化實驗室常用的分析儀器。
C.紫外可見分光光度計的光譜范圍:
常見的紫外可見分光光度計的波長范圍為190-1100 nm。通常所指的可見光譜范圍為400-700 nm,是指被人眼能感知到的光譜范圍,200-400 nm為紫外光譜范圍。一般,在可見區(qū)測試的樣品必須是有色物質(zhì)。
D.紫外可見分光光度計具體應(yīng)用如下:
1)核酸、蛋白濃度測量以及細菌生長濃度測量。
2)食品、水質(zhì)、合金等樣品中的金屬元素(如鐵、錳、鎘、銅、鋁等)及非金屬元素(如硅、磷/磷酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽、氟化物等)分析。
3)與其他分析儀器聯(lián)用,并進行定性分析,如有機化合物的分析、藥物分析。常見的 分析手段如:與標(biāo)準物及標(biāo)準圖譜對照;比較大吸收波長吸收系數(shù)的一致性。
E.紫外可見分光光度計的使用方法:
1)溶液裝入比色皿約2/3高度處為宜;盡量避免氣泡的產(chǎn)生;若溶液殘留在比色皿外壁,應(yīng)及時擦拭干凈(先用濾紙吸干,然后用擦鏡紙輕拭光面);對于易揮發(fā)的樣品,建議使用比色皿蓋;盡量避免沾污樣品架,否則應(yīng)及時擦去樣品架上殘留液體。
2)比色皿使用完畢應(yīng)及時清洗,并用適當(dāng)?shù)姆椒ㄇ逑矗羟逑床划?dāng)或沒有清洗干凈,也會影響測量結(jié)果的準確度和穩(wěn)定性。
3)測試過程中,若某一光源不用,可選擇將其關(guān)閉,以延長燈的使用壽命;儀器不用時,請及時關(guān)機、并拔掉電源插頭,以防止雷雨天氣可能造成的損壞。
4)請勿擅自拆卸儀器外殼和內(nèi)部零部件,尤其是光路結(jié)構(gòu)部分,切勿隨意松動其緊固螺釘和螺母;請勿隨意觸碰各光學(xué)表面(包括光源),以免影響儀器的正常工作、甚至造成人為損壞。
5)保持儀器表面和工作環(huán)境的清潔;杜絕使用汽油、乙mi等有機溶液擦拭儀器外殼;儀器不用時可用防塵罩進行防護。
6)紫外可見分光光度計應(yīng)避免長期不用,建議定期開機確保其能正常運轉(zhuǎn);溫、濕度較高的地區(qū)應(yīng)特別注意防潮。